医药/医疗器械检测

 

岛津(广州)检测技术有限公司,按照ISO/IEC 17025、RB/T 214和《检验检测机构资质认定管理办法》的要求建立全面质量管理体系,配置DB/CS版软件,参照GMP、GLP规范运行,并制定有符合CNAS和CMA相关认可认定要求的质量手册和程序文件,同时满足《中华人民共和国药品管理法》的执行操作规定,保证实验室活动的审计追踪、数据可靠与报告质量。

我们的优势:

►综合的服务领域

检测分析涵盖原料药、各类药品(创新药、仿制药、制剂、饮片、中成药、中药材、中药颗粒等)、 医药辅料、医药包材、医疗器械、医疗器械材料等

药物接触系统相容性与密封性研究

包材相容性服务:包装容器相容性研究、生产组件相容性研究、给药器具相容性研究

容器/内容物相互作用:可提取物、浸出物/迁移物研究

包装材料测试(玻璃、塑料、胶塞等):鉴别、限度测试、重金属、性能测试、水蒸气透过率、密封性测试

杂质研究

基因毒性杂质、元素杂质、有关物质、溶剂残留

处方逆向工程

原研制剂各组分定量分析、原料药的固态表征、制备工艺的确认

方法开发与验证

依照ICH指南或客户需求进行方法验证、药典方案的方法确认、稳定性测试方法的开发和验证、实验室间方法转移、方法再验证

稳定性研究

长期稳定性研究、影响因素试验、加速稳定性研究、ICH放置条件或其他指定要求

分析测试

理化测试、微生物测试、生物测试

►先进的仪器设备

-拥有岛津集团高科技分析和测试仪器

-全球一线品牌高配置仪器设备

►专业的技术团队

-高水平的仪器应用和研发能力

-丰富的检验检测及研发经验

►独家的个性化服务

-提供免费预研、仪器应用技术支持等服务

 

 

雷尼替丁、二甲双胍中NDMA的分析方案

雷尼替丁中NDMA的检测

2019年9月13日,FDA发表声明,提醒患者和医护人员在雷尼替丁中发现NDMA。自2018年来,FDA一直在研究血管紧张素II受体阻滞剂(ARB)中NDMA和其他亚硝胺类遗传毒性杂质,并建议进行了多次召回。本次雷尼替丁中NDMA的报道,制药巨头诺华及旗下制药公司第一时间宣布其产品召回,小小NDMA竟然带来如此轩然大波。

遗传毒性杂质(Genotoxic Impurities, GTI)又称基因毒性杂质,由于杂质的遗传毒性主要通过Ames试验界定,所以也称为致突变杂质。烷基磺酸酯类和氮亚硝胺类都是常见的遗传毒性杂质。而本次雷尼替丁事件的主角是N-二甲基亚硝胺(NDMA),又名N-亚硝基二甲胺(CAS#62-75-9),是由二甲胺与亚硝酸盐在酸性条件下反应而生成的黄色液体,广泛存在于在环境中,已确定为动物致癌物,多种短期致突变试验出现阳性结果。该物质曾于2018年7月爆出存在于沙坦类ABR药物中而广受大众关注。前不久,一种名为雷尼替丁的H2受体拮抗剂中被检出含有此类物质,FDA同时亦指出,此前用于沙坦类药物中氮亚硝胺检测的GCMS方法不适用于雷尼替丁,原因在于雷尼替丁的结构中,硝基和二甲胺结构在高温下从母核解离,结合为N-亚硝基二甲胺,对GCMS中常用的顶空进样方式结果产生干扰,由此也引起社会上关于此药物基毒杂质超标万倍的不实报道而引发的使用人群恐慌。

针对雷尼替丁的特殊结构,FDA发布了一项LC-HRMS 的分析检测方案,其中对该药物中NDMA的前处理方法、灵敏度和检测限均做了要求。岛津依据此要求,针对性的开发了三重四极杆液质联用仪(LCMS-8050)的分析方案,同时开发了高分辨质谱仪Q-TOF(LCMS-9030)的分析方法以供选择。

 

I法:三重四极杆液质联用法

使用LCMS-8050以MRM模式监测NDMA的特征离子对,灵敏度结果显示,1 ng/mL 标准溶液S/N>13。

浓度2 ng/mL标准样品,重复测试6次,结果显示保留时间和峰面积的相对偏差为0.09%和4.98%。
 
 
采用外标法绘制标准曲线,在1-200 ng/mL浓度范围内线性相关系数>0.999,各标准点准确度在94.9%-102.8%之间。
 

根据上述测试方法对某雷尼替丁原料药进行检测,同时对阳性检出样品做加标回收率测试。结果显示:样品中检出NDMA为7.59 ng/mL(0.25 ppm),平均加标回收率为101%。

根据上述方法对某雷尼替丁胶囊进行测试,结果显示制剂中检出NDMA为5.41 ng/mL (0.18 ppm)。
 
 
II法:高分辨质谱法
 
使用LCMS-9030分析中,NDMA的监测离子为m/z 75.0553,按照FDA方案设置,质量允差范围为15ppm。此条件下,其LOQ 的1 ng/mL(0.033 ppm)浓度水平响应良好;2 ng/mL对照品溶液连续分析6次,NDMA峰面积的RSD为8.4%;间隔6个样品的对照品溶液测试,所有峰面积的RSD为8.15%,均满足法规要求。
 
NDMA在1.14-146 ng/mL浓度范围内线性良好,相关系数大于0.999。曲线各标准点浓度回读准确度在86.95-112.32%之间。
 

平行称取三份雷尼替丁样品检测,NDMA的测定结果平均为3.3 ng/mL(含量为0.11ppm),针对该样品的0.1 ppm加标回收率考察结果均值为88.39%。

以上I法和II法均可作为雷尼替丁中NDMA的检测。

氮亚硝胺类遗传毒性杂质,除了本例中提及的NDMA外,另外还有NDEA、NMBA等多种,岛津开发了药物中该类物质的检测方法,如《GCMS法测定缬沙坦原料药中遗传毒性杂质NDMA和NDEA》《LCMS-8050同时检测遗传毒性杂质NDMA、NDEA和NMBA》等。同时,烷基磺酸酯类、溶剂类、苯胺、肼类等具有遗传毒性和潜在遗传毒性杂质的检测方案均收录于《岛津遗传毒性杂质分析解决方案》。

在“以科学技术向社会做贡献”的创业宗旨和实现“为了人类和地球的健康”这一愿望的经营理念的指导下,岛津人将始终致力于为用户提供更加先进的产品和更加满意的服务,岛津愿与广大医药科学家一起,为人类安全与健康共同努力。

附:《药品中基因毒性杂质检测整体解决方案》目录
 
参考文献
1. Zantac (ranitidine): Safety Information - NDMA Found in Samples of Some Ranitidine Medicines. https://www.fda.gov/safety/medical-product-safety-information/zantac-ran...
2. 遗传毒性杂质的警示结构. 马磊等,Chinese Journal of New Drugs 2014,23(18)
3 FY19-177-DPA-S. Liquid Chromatography-High Resolution Mass Spectrometry (LC-HRMS) Method for the Determination of NDMA in Ranitidine Drug Substance and Drug Product,FDA
4. FY19-059-DPQR-S, Review of Potential NDMA Formation from Ranitidine HCl (July 5, 2019)
 
 
 
二甲双胍中NDMA的检测
针对二甲双胍中NDMA的检测,依据中国食品药品检定研究院二甲双胍中NDMA推荐检测方法的要求,岛津开发了高效液相色谱-串联质谱法(LC-MS/MS),气相色谱-三重四极杆质谱法(GC-MS/MS)的分析方案,同时亦开发了单四极杆气质联用法(GC-MS)的高性价比选择方案。
 
I法:高效液相色谱-三重四极杆质谱联用法
1 ng/mL NDMA标准溶液进行灵敏度测试,其结果如下:
 
配制1-100 ng/mL浓度范围内系列标准溶液,直接进样测定。用外标法绘制标准曲线,线性相关系数>0.999,准确度为96.9%-101.2%之间,线性良好。2 ng/mL重复性测试结果显示,保留时间和峰面积的相对标准偏差分别为0.14%和5.63%。二甲双胍原料药加标回收率测试,2ng、5ng、10ng, 加标回收率分别为107.6%、100.1%、103.3%。
 
根据上述方法对某片剂进行测试,结果显示片剂中检出NDMA,含量为1.50 ng/mL(28.9 ng/g),样品加标回收率测定结果为92%。
 
 
II法:气相色谱-三重四极杆质谱联用法
 
使用GCMS-TQ8050 NX以MRM模式监测NDMA的特征离子对,灵敏度结果显示,0.25 ng/mL标准溶液S/N>11

浓度0.5、1、5 ng/mL标准溶液,分别重复测试6次,结果显示峰面积的相对标准偏差分别为4.03%、3.30%、2.76%

采用上述方法对某二甲双胍成品药进行检测,该样品中检出NDMA 13.6 ng/g,对阳性样品进行加标回收测试,加标20 ng/g,平均回收率为85.0%

 

III法:单四极杆气质联用法

使用单四极杆气质GCMS-QP2020 NX分析中,以SIM模式监测特征离子,以NDMA-d6为内标,采用内标法定量。灵敏度结果显示,1.0 ng/mL标准溶液S/N为16.2。2 ng/mL标准溶液重复分析6次,目标物与内标峰面积比值的标准偏差为3.99%。NDMA在1~100 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数>0.999

取二甲双胍样品进行检测,NDMA测定结果为68.0 ng/g。对此样品进行48 ng/g的加标回收率测试,平行三次加标,平均回收率为93.7%。